习欠云 刘小龙 方淑娴 张永亮
摘 要 以人参多糖复合物作为免疫增强剂，选取体长为（9.00±0.10） cm,体重5.00～7.00 g,健康状况良好的南美白对虾为试验动物，试验组投喂添加有人参多糖复合物（0.04%）的饲料,对照组投喂基础饲料。试验期为30 d，测定分析对虾肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、血清中酚氧化酶（PO）和溶菌酶（LSZ）的活力以及肌肉中丙二醛（MDA）的含量变化。结果表明人参多糖复合物对南美白对虾具有较强的抗氧化作用,可以明显提高对虾肝脏中的SOD的活力(P<0.01),第15 d和第30 d采样点的SOD的活力最高为25.70和11.05 U/mg*prot；而人参多糖复合物对于对虾血清中PO和LSZ的活力的调节,只作用在一定的时间段(P<0.05),最高含量为第15 d采样点,达11.67和18.13 U/mg*prot,作用的力度随着饲喂时间的加长而降低；至于对肌肉中的MDA的含量则有一定的下降力度(P<0.05),但也只作用在一定的时间段内(第15 d采样点：6.2×10-3 nmol/ mg*prot),作用的力度也是随着饲喂时间的加长而降低。
关键词 南美白对虾；人参多糖复合物；免疫增强剂
中图分类号 S816.7
水产动物在长期生命进化过程中形成了独有的免疫系统，但虾类的免疫系统还很不成熟，主要以非特异性免疫（Non-specific immunity）为主。非特异性免疫是指生物在长期进化过程中形成的、属于先天所有、相对稳定、无特殊的抵抗病原体的天然抵抗能力。
相对于细胞免疫而言，虾类的体液免疫研究要多一些。一般认为，虾类体液中不含有免疫球蛋白，然而体液中含有的凝集素、溶菌酶（LSZ）、超氧化物歧化酶（SOD）、酚氧化酶（PO）、丙二醛（MDA）、酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（AKP）、过氧化氢酶（CAT）以及血细胞释放的proPO激活系统等体液免疫因子，能以不同的途径消灭异物并抵御病原体的侵袭。
自1993年全国养殖对虾因感染对虾白斑综合症病毒（WSSV）而发生大规模爆发流行病以来，在采取其它防病措施的同时，人们已开始把注意力转移到如何调动或激活虾类自身的免疫系统，提高其非特异性免疫功能和抗病力，以达到预防和抵抗虾病的目的。人参作为传统中医的“补气”药，已有数千年的临床用药历史，人参多糖（Giseng polysaccharide,GPS）为人参的主要药物成分之一。近年研究表明，GPS具有刺激网状内皮系统、诱导淋巴细胞和脾脏T细胞的增生、增强吞噬细胞活性、提高NK细胞的杀伤活力、诱导产生干扰素等功能，能明显增强免疫系统的功能并有免疫抗肿瘤和辅助抗肿瘤活性，GPS还有降血糖的作用，并对血细胞的生成有重要调节作用。
本试验旨在人参多糖与酵母硒等复合物用于对虾养殖方面的研究，以人参多糖复合物作为免疫增强剂，添加一定量(0.04%)到饲料里投喂给南美白对虾，通过测量对虾体内酚氧化酶（PO）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶(SOD)和溶菌酶（LSZ）的变化，来检验人参多糖复合物是否具有提高对虾机体免疫力的效果。
1 材料与方法
1.1 试验材料
本试验所使用的南美白对虾由珠海市永辉水产有限公司提供，规格为体长（9.00±0.10） cm,体重5.00～7.00 g，健康状况良好。把试验虾随机分成2组，试验组和对照组，每组设3个重复，每个重复50尾，共300尾。饲养于规格为55 cm×40 cm×25 cm的无毒塑料水族箱内。试验组投喂添加有人参多糖复合物（0.04%，主要成分为人参多糖及酵母硒）的饲料，对照组投喂基础饲料（见表1）。人参多糖及酵母硒由本实验室制备。
1.2 试验方法
从暂养到试验结束一直充气,水深保持在25 cm，水温在23～28 ℃，试验期间盐度一直保持在30左右,每天换1次水，当天更换所用的水为前一天经曝晒处理的，换水量在1/3～1/4。每天投喂3次，投喂量为4%~7%,并依情况而定。试验期为30 d。养殖结束后，对每只虾进行体重和体长的称量与测量，根据公式计算各组虾的相对增重率：相对增重率=（末平均体重-初平均体重）/初平均体重。分别在第0、15和30 d进行采样，提取试验组和对照组虾的血液、肝脏、肌肉和组织匀浆进行相关指标酚氧化酶(PO)、MDA、SOD、溶菌酶（LSZ）的测定。
1.3 数据处理
本试验主要用Excel软件和SPSS 16.0软件处理试验所得数据。结果以平均值±标准误差（mean±SE）表示。
2 结果与讨论
2.1 人参多糖复合物对南美白对虾肝脏中超氧化物岐化酶（SOD）活力的影响（见表2）
饲喂30 d后,试验组和对照组南美白对虾的肝脏中超氧化物歧化酶SOD的活力变化见表2。由表2分析可得，第15 d和第30 d的采样，试验组与对照组SOD的活力变化的差异都极显著（P<0.01）；而在对照组3个时间段的采样比较，有一定的差异，但差异不显著（P>0.05）；试验组3个时间段的采样比较中，有比较大的差异，差异极显著（P<0.01）。由以上数据的分析可得出，在南美白对虾饲料中添加人参多糖复合物免疫增强剂，能使其肝脏中SOD的活力得到显著提高，抗氧化活力明显增强。
2.2 人参多糖复合物对南美白对虾血清中酚氧化酶（PO）的影响（见表3）
从表3的可分析得出，饲喂含人参多糖复合物饲料的试验组的南美白对虾血清中PO的活力与饲喂基础饲料的对照组只有在第15 d的采样结果中有明显的差异(P<0.05)。这表明，添加人参多糖复合物这种免疫增强剂对激活对虾血清中酚氧化酶的活力没有太大的明显性变化，在第15 d和第30 d的采样结果中均有提高，故其活力有一定的增强。
2.3 人参多糖复合物对南美白对虾血清中溶菌酶（LSZ）活力的影响（见表4）
从表4可分析得出，饲喂含人参多糖复合物饲料的试验组的南美白对虾血清中LSZ的活力与饲喂基础饲料的对照组只有在第15 d的采样结果中有明显的差异(P<0.05)；虽然于第30 d的采样结果中也有一定的差异，差异不显著(P>0.05)。这表明，添加人参多糖复合物对激活对虾血清中溶菌酶的活力没有太大的明显性变化，虽在第15 d和第30 d的采样结果中均有提高，但差异并不显著(P＞0.05)。虽其活力有一定的提高，但提高的效果只在某一时间段有明显的差异，随着服用这种免疫增强剂的时间的加长，其提高的效果差异不明显。
2.4 人参多糖复合物对南美白对虾肌肉中丙二醛（MDA）含量的影响（见表5）
由表5分析得出,饲喂人参多糖复合物含量为0.04%饲料的试验组的南美白对虾肌肉中丙二醛(MAD)的含量在第15、30 d的采样中和对照组有明显的差异（P<0.05）；差异显著。以上数据分析表明人参多糖复合物作用在南美白对虾肌肉中丙二醛（MAD）含量的影响与作用在血清中酚氧化酶和溶菌酶活力的影响一致，均在第15 d采样结果中有显著的差异，但随着服用时间的加长，与对照组的差异即减少，对于MAD含量的调节在时间段上有一定的限制性。
2.5 生长指标
试验结束时，称量每组虾体重，作为最后的体重,并与初始体重比较，结果见表6。
根据表6数据以及公式相对增重率(%)=（末平均体重-初平均体重）/初平均体重×100,可以计算出各组南美白对虾在饲喂人参多糖复合物饲料30 d后的相对增重率，见表7。
由表7的数据可以明显看出，试验组的南美白对虾的相对增重率比对照组的要高出将近3个百分点。
3 结论
人参多糖复合物对于对虾肝脏中SOD超氧化物歧化酶的活力有明显的作用效果，可以有效地提高对虾肝脏中的SOD的活力；而对于血清中PO和LSZ的活力的影响则非常雷同,均在第15 d采样点时出现最大限度的活力的提高，随着饲喂时间的加长而出现活力提高度的下降；对于肌肉中的MDA，即和血清中PO和LSZ的活力受到的影响一致，均在第15 d采样点时出现最大限度的含量的降低，随着饲喂时间的加长而出现含量下降的情况。结果表明，人参多糖复合物对南美白对虾具有显著的抗氧化作用（P<0.01），为进一步制备对虾等无脊椎动物的免疫增强剂提供了一定的试验依据。
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（编辑：徐世良，）
习欠云，华南农业大学动物科学学院，510642，广东广州。
刘小龙、方淑娴、张永亮（通讯作者），单位及通讯地址同第一作者。
收稿日期：2009-02-02 |
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