韩 杰 徐志林 高军泰 何勇琴
摘 要 试验研究3种中草药当归、黄芪、五味子的浸提液对泥鳅抗缺氧能力的影响，并探讨其最适剂量。试验采用密封瓶口的方法，测定泥鳅的存活时间。结果表明，1‰的当归、黄芪、五味子浸提液不同程度的影响了泥鳅的存活时间。其中，1‰的当归浸提液组泥鳅的存活时间比对照组减少了16.23%(P<0.05)；1‰的黄芪浸提液组泥鳅的存活时间比对照组增加了20.39%(P<0.05)；1‰的五味子浸提液组泥鳅的存活时间比对照组增加了29.07%(P<0.01)。1‰的黄芪和五味子浸提液可以显著和极显著的提高泥鳅的抗缺氧能力，而1‰当归浸提液对泥鳅的抗缺氧能力有减弱作用。
关键词 中草药；泥鳅；抗缺氧
中图分类号 S963.73
溶氧是水产养殖中最重要的水质因子之一，水体的实际溶氧量常受到其中生物、物理和化学等因素的共同影响而时刻变化[1]。在高密度养殖的模式下，环境中的各种因素均可能造成水产动物自身需氧量增加或水体溶氧量降低，当水中溶氧不足时，可直接对养殖动物产生不利影响；也可通过影响水体环境中其它生物、水体的物化指标而间接影响养殖动物，对水产动物的生长、繁殖甚至生存造成不同程度的危害[2]。
中草药取自天然动植物产品，保持了其成分、结构的自然状态和生物活性，与化学添加剂相比，具有低毒、低残留、耐药性不显著等特点[3]。随着对中草药的药理作用的深入研究，中草药抗缺氧作用在水产养殖业内逐渐受到重视[4]。本文研究了黄芪、当归、五味子等三种中草药浸提液对泥鳅抗缺氧功能的影响，为具有抗缺氧功能的中草药在水产养殖中的应用提供参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 中草药
当归、黄芪、五味子购于洛阳西工区同仁堂药店。
1.1.2 试验泥鳅
购于洛阳水产品市场，体长9.3～13.5cm，体重6.8～8.2 g。对刚购回的试验泥鳅除去死、弱个体，在经充分曝气的自来水中暂养1 d，其间不投喂饲料。
1.2 试验方法
1.2.1 中草药浸提液的制备
分别取当归、黄芪、五味子80 g置于3个装有400 ml蒸馏水的烧杯中浸泡1 h,然后将3个烧杯放于电炉上煎煮至沸腾后再继续煮沸1 h,用纱布过滤药渣,药渣再加240 ml蒸馏水煎煮1 h,再过滤;将两次煎煮的滤液合并在1个三角瓶中,加热浓缩成80 ml浸提液，此浸提液的生药含量为80 g生药量：80 ml浸提液，即每毫升浸提液中含生药1 g。
1.2.2 试验设计及过程
将试验泥鳅随机分成4组，每组3个重复，每个重复3尾泥鳅，其中第一组为对照组，用250 ml三角瓶装满煮沸后经冷却的蒸馏水，放入3尾泥鳅；其余3组试验组的三角瓶中分别装满用浓缩浸提液配制成的1‰的中草药浸提液，每瓶放3尾泥鳅。用塑料密封每个三角瓶，瓶内不留气泡，将三角瓶倒置于水中，观察并记录三角瓶中泥鳅的全部死亡时间，以探讨三种中草药对泥鳅抗缺氧能力的影响。
1.2.3 试验数据分析
试验数据采用SPSS11.5统计软件中的单因子方差分析进行统计分析，若差异显著用LSD法进行多重比较，数据以X±S表示。
2 结果与分析
在试验中,除了试验1组外,其余各试验组的泥鳅的表现都较对照组泥鳅安静。试验开始后的1 h内,泥鳅均能在水中正常游动,之后鱼体渐渐失去平衡,偶尔用力挣扎游动,而后鱼体丧失游泳能力,口和鳃不断开闭,直至死亡。死亡时泥鳅全部飘浮水体上方,同时口和鳃盖扩张,绝大多数死亡体体弯曲变形,眼睛充血。三种中草药浸提液对泥鳅抗缺氧能力的影响见表1。
从表1可见，1‰的当归浸提液组泥鳅的存活时间比对照组泥鳅的存活时间减少16.23%（P<0.05），说明1‰的当归浸提液显著降低泥鳅的抗缺氧能力。1‰的黄芪浸提液组泥鳅的存活时间比对照组泥鳅的存活时间增加20.39%（P<0.05），可见1‰的黄芪浸提液可显著增强了泥鳅的抗缺氧能力。1‰的五味子浸提液组的泥鳅存活时间比对照组泥鳅的平均存活时间增加了29.07%（P<0.01），可见1‰的五味子浸提液可极显著的增强了泥鳅的抗缺氧能力。
3 讨论
本试验采用密封瓶口并将三角瓶倒置于水中的方法，三角瓶中水的溶氧量一定，且在相同溶氧量的条件下，随着泥鳅对氧的消耗，二氧化碳分压升高，水中pH值降低，加重了缺氧程度，最后造成泥鳅呼吸中枢麻痹而死亡。缺氧对呼吸中枢的抑制可随着缺氧程度的加深而加强，直到呼吸停止，同时脑和心脏缺氧也是死亡的重要原因。
当归抗低氧的有效成分主要包括苯酞类、香豆素类、黄酮类、挥发油类化合物等[5]。目前普遍认为,当归可以通过抗自由基损伤、调节基因表达、激活蛋白酶、影响一氧化氮生成等方面发挥抗缺氧保护作用。金香子[6]试验表明：当归水提取物可明显增强乳鼠心肌细胞超氧化物歧化酶SOD活性、明显降低MDA含量，心肌细胞的线粒体损伤得到明显修复,当归对缺氧心肌细胞具有抗氧化作用。本试验研究了1‰的当归浸提液对泥鳅抗缺氧能力的影响，与金香子等的试验结果不同，本试验中1‰的当归浸提液与对照组相比降低了泥鳅的抗缺氧能力16.23%(P<0.05)，这可能与试验动物的种类有关，也与试验时所使用的当归浸提液的剂量有关，当归降低泥鳅的抗缺氧能力可能是当归抑制了泥鳅的中枢神经，增加了泥鳅肝组织的耗氧量，提高泥鳅全身的代谢功能，引起泥鳅血压骤降，使其呼吸受到抑制，导致死亡[7]。
黄芪为豆科植物，其有效成分为黄芪总黄酮、总皂甙、总多糖和胆碱等。近年来对黄芩的药理作用研究表明，黄芩具有抑菌、利尿、抗炎、抗变态反应、解痉及降压作用[7]。聂荣庆等[8]的试验研究表明，黄芪注射液能显著降低缺氧诱导的神经细胞凋亡率 ,增加了缺氧的神经细胞Bcl-2蛋白的表达 ,同时减少了Bax蛋白的表达，黄芪对缺氧条件下的神经细胞有直接的抗凋亡作用。本试验研究结果表明，能显著增加泥鳅的抗缺氧能力，可能与黄芪能在一定程度上解除缺氧对泥鳅中枢神经系统的痉挛作用，降低泥鳅的血压，其具体的作用机制还有待进一步研究。
五味子为木兰科多年生落叶木质股本植物，具有收敛、固涩、益气生津、补肾宁心的作用。刘忠民等[9]的试验研究表明，五味子浸提液可显著提高脑静脉血及大脑皮质SOD活性，五味子浸提液有保护组织免受脂质过氧化损伤的作用。本试验结果也表明，1‰的五味子浸提液能极显著增加泥鳅的存活时间，提高其抗氧化能力。这可能是五味子浸提液对泥鳅被缺氧抑制的中枢神经有兴奋作用。但五味子浸提液能延长泥鳅抗缺氧能力的有效成分还有待进一步研究。
4 结论
4.1 本试验中，1‰当归浸提液对泥鳅的抗缺氧能力有减弱作用，其提高泥鳅抗缺氧能力的适宜剂量还有待进一步研究。
4.2 1‰黄芪和五味子浸提液可显著和极显著的提高泥鳅的抗缺氧能力，但1‰的浓度是否为提高泥鳅抗缺氧能力的最适宜剂量还有待进一步研究。
4.3 3种中草药浸提液发挥作用的有效成分和作用机制还有待研究。
4.4 几种中草药的配合使用对泥鳅抗缺氧能力的影响研究还未见报道，应加强复方中草药对泥鳅抗缺氧能力影响的研究。
参考文献
[1] 阮国良.养殖水体溶解氧的基本原理及生态学意义[J].渔业制富指南,2006(3):58-60．
[2] 魏万权,林仕梅.水产养殖中溶解氧的研究[J].饲料工业.2007,28(16):20-23．
[3] 郁桐炳,沈丽红.中草药添加剂在水产养殖中的初步应用[J].中国水产.2005(11):59-60．
[4] 孟喜成,王青兰.中药抗整体动物缺氧作用的研究进展[J].药学实践杂志,2008,26(1):7-9.
[5] 李明明,吴丽颖.当归有效成分抗缺氧损伤作用的研究进展[J].军事医学科学院院刊.2008(1):20.
[6] 金香子.当归对缺氧培养心肌细胞保护作用的实验研究[J].时珍国医国药.2008(12):30
[7] 江苏新医学院编.中药大辞典(下册)[Z].上海:上海人民出版社,1977:2017-2019.
[8] 聂荣庆,李扣华,胡国柱,等.黄芪抗新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡研究[J].中国中医基础医学杂志.2004(11):18-21.
[9] 刘忠民,陈练,董加喜,等.兔脑缺氧──复氧性损伤与五味子提取液的保护作用[J].中草药.1996(6):32-35.
（编辑：徐世良，）
韩杰，洛阳师范学院生命科学系，讲师，471022，洛阳市龙门路71号。
徐志林、高军泰，单位及通讯地址同第一作者。
何勇琴，上海海洋大学食品学院。
收稿日期：2009-04-28 |
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